Q：条带模糊的原因？

A：

• 电压过高或电泳时间过长，产热过多导致电泳缓冲液温度升高。建议参照Trans产品使用说明书。

• 电泳缓冲液陈旧，建议使用新鲜的电泳缓冲液，为了获得理想的结果建议在使用前预冷缓冲液。

• 分离胶的浓度偏低，建议使用合适的胶浓度。

• 凝胶放置时间过长，建议使用新配制的凝胶电泳。

Q： 为什么有时候带型不整齐？

A：

• 建议点样时将蛋白Marker放在泳道中间。如在凝胶两侧泳道，由于边缘效应、离子强度不均等原因，均会导致带型变宽或弯曲。

• 凝胶配制不匀，凝胶内存有气泡，或点样孔中有细碎的残胶。

Q：电泳时蛋白Marker分离不开？

A：大多为胶浓度不合适，要在推荐的凝胶浓度范围内使用。此外，比较陈旧的凝胶和缓冲液也会造成电泳效果不好。

Q：预染Marker电泳后清晰，但是转膜后颜色很浅？

A：

• 转膜时一定要将胶和膜压紧，否则条带会在转膜过程中丢失或变浅。

• 转膜条件不适合，建议200 mA、2小时，或100 mA过夜转膜。

Q：转膜时甲醇的浓度是多少，会对转膜造成什么影响？

A：甲醇的浓度一般推荐为15%，甲醇浓度太高易造成蛋白穿膜，转移到滤纸上。

Q：发光液配制需要避光吗？

A：不需要避光，但是要现配现用，配制后马上进入暗室进行下面的操作。

Q：发光液的有效曝光时间多长？

A：发光液在2小时以内均可以曝光，但是前30分钟曝光能力较强，随着时间的推移可适当延长曝光时间来调节曝光强度。

Q：曝光后X光片背景很黑是什么原因？

A：背景很黑可能是曝光时间太长或者显影时间过长造成的。

Q：Western Marker 曝光后杂带很多是什么原因？

A：Marker上样量过多或曝光时间过长，可适当减少上样量或曝光时间。此外，二抗的浓度过高或特异性和纯度不高，也会造成杂带较多的结果。