TransDetect® qPCR Mycoplasma Detection Kit

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FM321-0050 rxns8400
FM321-01100 rxns16800
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产品详情介绍

本产品采用TaqMan实时荧光定量PCR法检测支原体DNA,用于定性检测如培养基、细胞培养物、生物制品等样品中的支原体污染。可检测的支原体种类涵盖范围广,包括柔膜菌纲(Mollicutes)下的多种支原体(Mycoplasma spp.)、无胆甾原体(Acholeplasma spp.)、螺原体(Spiroplasma spp.)等。本试剂盒按照EP 2.6.7和JP G3支原体检测相关指南和要求进行验证。

本试剂盒中的TransDetect® qPCR Mycoplasma SuperMix组分包含Taq热启动酶、针对支原体检测特殊优化的qPCR反应缓冲液、dNTPs、PCR增强剂、稳定剂。此外,本反应液引入了dUTP/UDG系统,可在反转录前降解含U的ssDNA和dsDNA,消除由PCR产物导致的交叉污染。Primer&Probe Mix为扩增支原体序列和扩增Internal Control的引物、探针。FAM通道检测支原体特异性扩增;VIC通道检测Internal Control的扩增。Internal Control可PCR 反应阶段加入,排除因 样品中含有PCR抑制因素导致的假阴性结果;内部对照(IC)也可在样品提取阶段加入,以评估提取效果,排除DNA提取不当而导致的假阴性。本试剂盒与支原体DNA提取纯化试剂盒MagicPure® 32 Mycoplasma DNA Kit(EH401-32)配套使用,高效提取样品中的支原体DNA,检测限可达到10 CFU/ml。



产品组成

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实验数据

灵敏度高

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10种10 CFU/mL支原体标准株DNA的扩增结果显示,TransGen产品在检出限10 CFU/mL浓度下,检出率可达到100%。(扩增图是发酵支原体标准品检测结果展示)


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以上物种基因组DNA的扩增结果均为阴性,表明TransGen产品特异性高,与非支原体物种无交叉反应。


耐用性高

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分别用以上基质稀释阳性支原体悬液,对照基质为无核酸酶水,DNA提取后进行qPCR检测。结果表明,各基质组的Ct值与对照接近, Ct值滞后不超过0.6,上述基质对支原体检测无明显影响。


冻融稳定性高

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TransGen产品反复冻融5次、10次、15次,产品性能不受影响。


稳健性好

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TransGen产品可以耐受20%的引物或扩增Mix的加样误差,不影响结果判断。


仪器兼容性广

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AG: 精氨酸支原体质粒标准品           LA:莱氏无胆甾原体质粒标准品

以不同浓度的精氨酸支原体和莱氏无胆甾原体的质粒标准品为模板,在不同仪器上进行扩增得到的Ct值。结果显示,TransGen产品兼容性高,可适用于不同机型荧光定量qPCR仪。对于接近检出限(1 copy/μL)的弱阳样本,均可稳定检出。



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