Q：电泳条带模糊?

A：

• 电泳缓冲液缓冲能力差。 电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，pH值上升，缓冲性能下降，可使DNA电泳产生条带模糊和不规则的DNA条带迁移的现象。

• 电压过高，电泳时间过长。电泳时电压不应该超过20 V/cm，电泳温度应该低于30℃。如果电泳时电压和温度过高，可能导致出现条带模糊和不规则的DNA条带迁移的现象。特别是电压太高易出现缺带现象。电泳过程中由于会产热，因此电泳时间长容易发生条带模糊，特别是小片段会变得模糊。

• 凝胶放置时间太长或琼脂糖的质量差，导致DNA 条带分辨率降低。

Q：DNA Marker 降解?

A：污染了核酸外切酶。建议用灭菌的枪头，用后及时将管盖拧紧。点样时勿将电泳缓冲液带入管中，建议更换枪头。

Q：用EB琼脂糖胶电泳不同时间会出现条带亮度变化?

A：由于电泳过程中条带与EB泳动方向相反，结合EB的量会随时间变化，因此电泳后条带亮度会发生变化。因此建议使用EB染胶实现精准定量。

Q：DNA Marker电泳条带分离效果不好?

A：琼脂糖制胶浓度不合适，导致分辨率降低。制胶不均匀有时也会导致电泳异常。建议使用新制备的凝胶，制胶时注意操作中带来的浓度误差。一般对于大分子量片段，低浓度胶分离效果好；对于小分子量片段，高浓度胶分离效果好。

Q：不同核酸染料对DNA Marker 迁移率的影响?

A：预加GeneFinder、GelStain、GoldView到DNA Marker中，对Marker的迁移率都有一定的影响。